PCR en Infarto Agudo de Miocardio

Tema: Mecanismos fisiopatológicos del remodelado y la calcificación arterial en la cardiopatía isquémica.

Objetivos:

1. Estudiar la relevancia del polimorfismo rs1043550 afectando la región 3'-UTR del gen CALU y evaluar la participación de calumenina y su regulación en el proceso de la calcificación vascular.
2. Analizar el papel de la MEC en un modelo celular de calcificación vascular en cultivos primarios de CMLV humana y de ratón.
3. Comparar los efectos de la warfarina y el acenocumarol, sobre la mineralización y activación del programa de diferenciación osteoblástica también en CMLV.

Muestra: Sangre: Concentrado Leucoplaquetario.

Acido Nucléico: ADN genómico.

Gen: Gen LUC (p3U-CALUa)-977pb

PCR: PCR en tiempo real

• Lisis: Shock Térmico
• Separación: Fenol Cloroformo
• Purificación: Etanol

      Protocolo PCR

1. Inicio: 1 ciclo de 4min a 94°C
2. Desnaturalización: 1min a 94°C
3. Hibridación: 1min a 58°C
4. Extensión: 2min a 72°C
   * El paso 2, 3 y 4 se hace en 34 ciclos.
5. Extensión final: 1 ciclo de 10min a 72°C

Visualización: Electroforésis (EFO).

Jover García Eva. Mecanismos fisiopatológicos del remodelado y la calcificación arterial en la cardiopatía isquémica. Universidad de Murcia, Facultad de Medicina. Junio 2016; 1-408. Disponible en:
https://dialnet.unirioja.es/servlet/tesis?codigo=128294

Prueba de Tamizaje y Confirmatoria del Infarto Agudo de Miocardio

Prueba de Tamizaje

La homocisteína total circulante elevada es un potente marcador pronóstico de enfermedad cardiovascular y mortalidad en pacientes con factores de riesgo preexistentes.

El infarto es una restricción del suministro de sangre a un órgano. La restauración del flujo sanguíneo y la reintroducción de la oxigenación se asocian a daño tisular y con respuesta inflamatoria. La hipoxia tiene una señalización purinérgica y la señalización a través de los receptores P2 y P1 juegan un papel central durante la isquemia. Estudios demuestran la liberación de ATP y receptores P2 en la generación de inflamación estéril durante la isquemia y la reperfusión.

Prueba Confirmatoria

El electrocardiograma sirve de orientación diagnóstica en alteraciones cardíacas como el infarto agudo de miocardio y sirve como herramienta capaz de evaluar su evolución. El síndrome de Wellens es un patrón electrocardiográfico de cambios en la onda T en las derivaciones precordiales, asociados a síntomas de angina inestable, presentándose cuando el paciente está libre de dolor, y sin elevación de las enzimas cardíacas. Esto diagnostica el desarrollo posterior del infarto de miocardio con alta sensibilidad y especificidad; por tanto en los pacientes que tienen estas características se debe considerar una estrategia invasiva temprana

EKG

ANGIOGRAFÍA

Vera Carrasco O. Electrocardiografía Básica en las unidades de cuidados intensivos. Rev. Méd. La Paz. 2014; 20(1): 56-73. Disponible en:
http://www.scielo.org.bo/pdf/rmcmlp/v20n1/v20n1_a11.pdf

Santiso R M , López S P, Companini L y Cabrera E O. Homocisteína, marcador de riesgo vascular. Mediciego. 2016; 22(4): 66-76. Disponible en:
http://www.medigraphic.com/pdfs/mediciego/mdc-2016/mdcs161i.pdf

Carvajal C A y Ardila D J. Síndrome de Wellens: reconociendo el peligro. Rev. Colomb. Cardiol. 2015; 22(5): 244-248. Disponible en:
http://www.scielo.org.co/scielo.php?pid=S0120-56332015000500007&script=sci_arttext&tlng=pt

Idzko M, Ferrari D, Riegel A K y Eltzschig H K. Extracellular nucleotide and nucleoside signaling in vascular and blood disease. Rev. Blood. 2014; 124(7): 1029-1037. Disponible en:
http://www.bloodjournal.org/content/bloodjournal/124/7/1029.full.pdf

Alteraciones de la Epigenómica en Infarto Agudo de Miocardio

Los microARN son una clase de ARN no codificante de tamaño pequeño que participan en la regulación génica. Los miARN han emergido como un mecanismo epigenético clave en el desarrollo y en la funcionalidad del sistema cardiovascular. Estas moleculas regulan funciones básicas en prácticamente todos los tipos celulares y por ello están directamente asociadas con la fisiopatología de un gran número de enfermedades cardiovasculares. Se ha estudiado los miARN como potenciales biomarcadores de patologías cardiovasculares como infarto de miocardio, enfermedad coronaria o insuficiencia cardiaca, incluso con propiedades fisicoquímicas y bioquímicas superiores a los indicadores proteicos convencionales utilizados actualmente en la práctica clínica.

Calvo D G, Iglesias-Gutiérrez E, Llorente-Cortés V. Biomarcardores epigenéticos y enfermedad cardiovascular los microARN circulantes. Rev Esp Cardiol. 2017;70:696-8. Disponible en:
http://www.revespcardiol.org/es/biomarcadores-epigeneticos-enfermedadcardiovascular los/articulo/S0300893217301586/

Alteraciones de la Traducción en Infarto Agudo de Miocardio

Los ARNmi son ARN no codificantes pequeños, monocatenarios y muy conservados, relacionados con el infarto de miocardio, la hipertrofia e insuficiencia cardíaca. Se ha demostrado que los ARNmi determinan el destino del corazón al regular la muerte y la regeneración de la célula cardíaca después del infarto de miocardio. 

También se ha explorado el papel de los ARNmi como objetivos diagnósticos, pronósticos y terapéuticos entornos clínicos. Investigaciones demuestran el papel del ARNmi en el infarto de miocardio y su influencia sobre la regeneración de los cardiomiocitos y la muerte celular, incluida la apoptosis, la necrosis y la autofagia.

Sun T, Dong Y, Du W, Chun S, Wang K, Muhammad-Akram T, Wang J y Li P. The Role of MicroRNAs in Myocardial Infarction: From Molecular Mechanism to Clinical Application. Int J Mol Sci. 2017 Apr; 18(4): 745-762. Disponible en:

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5412330/
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5412330/pdf/ijms-18-00745.pdf