PCR en Infarto Agudo de Miocardio

Tema: Mecanismos fisiopatológicos del remodelado y la calcificación arterial en la cardiopatía isquémica.

Objetivos:

1. Estudiar la relevancia del polimorfismo rs1043550 afectando la región 3'-UTR del gen CALU y evaluar la participación de calumenina y su regulación en el proceso de la calcificación vascular.
2. Analizar el papel de la MEC en un modelo celular de calcificación vascular en cultivos primarios de CMLV humana y de ratón.
3. Comparar los efectos de la warfarina y el acenocumarol, sobre la mineralización y activación del programa de diferenciación osteoblástica también en CMLV.

Muestra: Sangre: Concentrado Leucoplaquetario.

Acido Nucléico: ADN genómico.

Gen: Gen LUC (p3U-CALUa)-977pb

PCR: PCR en tiempo real

• Lisis: Shock Térmico
• Separación: Fenol Cloroformo
• Purificación: Etanol

      Protocolo PCR

1. Inicio: 1 ciclo de 4min a 94°C
2. Desnaturalización: 1min a 94°C
3. Hibridación: 1min a 58°C
4. Extensión: 2min a 72°C
   * El paso 2, 3 y 4 se hace en 34 ciclos.
5. Extensión final: 1 ciclo de 10min a 72°C

Visualización: Electroforésis (EFO).

Jover García Eva. Mecanismos fisiopatológicos del remodelado y la calcificación arterial en la cardiopatía isquémica. Universidad de Murcia, Facultad de Medicina. Junio 2016; 1-408. Disponible en:
https://dialnet.unirioja.es/servlet/tesis?codigo=128294